クロロフィルは、高等植物および他のすべての光合成生物に見られる緑色の色素である。クロロフィルAおよびクロロフィルBは、エタノール、エーテルおよびアセトンおよび他の溶媒に可溶であり、水および石油エーテルに不溶性であり、したがって、アセトン、メタノール、エタノール、酢酸エチルなどの極性溶媒を使用してクロロフィルを抽出することができる。
クロロフィル抽出プロセス:
クロロフィル抽出は、25°Cの半暗室で調製される。抽出手順は次のとおりです。
(1)新緑の葉1000グラムを取り、ウェクスラーで粉砕する。
(2)粉砕した緑葉1000gをアセトンに入れ、少量の炭酸カルシウム(温度20°C)を入れて抽出し、ろ過・洗浄後、葉片が無色になるまで抽出する。
(3)濾過したアセトン抽出液を石油エーテル1リットルとアセトン100mLを入れた漏斗に入れ、蒸留水を加えながら重層化するまで静かに回転させる。水層中のアセトンおよび水溶性不純物の大部分は廃棄され、石油エーテル溶液のみが残る。
(4)石油エーテル溶液を蒸留水で再度精製した後、石油エーテルとシュウ酸0.01gを含む200ml80%メタノール溶液で5回以上洗浄し、最終的に黄緑色の懸濁液を得る。
(5)懸濁液を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、厚さ3cmのショ糖粉末からなるカラムに浸潤させる。次に、析出した色素を洗浄してカロテノイドを除去し、天然クロロフィルのみを含むようにします。
(6)天然クロロフィルを含むショ糖カラムは2層に分かれており、緑色層は4~10mmクロロフィルB層を有し、他方の青色層は2~6mmクロロフィルA層である。
(7)青色層の中間に位置する部分(青色層の約半分)をエーテルに投入し、懸濁液を濾過抽出し、蒸留水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥後、調理器具で濾過してクロロフィルAを得る。
(8)(6)の緑色層の中央部分を取り除き、ろ過・洗浄用のエーテルに素早く入れてクロロフィルBエーテル溶液を作る。
抽出中に分離する方法は?
クロマトグラフィーは、有機化合物の分離、精製および同定のための重要な方法であり、特に微量分析において広く使用されている。果物や野菜の色素には、主に脂溶性カロチン、ルテイン、クロロフィル、水溶性アントシアニンが含まれます。抽出実験では、同様の混和性水溶性アントシアニンろ過の原理を利用することができ、薄層クロマトグラフィー、カラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)を利用してβ-カロチン、ルテイン、クロロフィルを分離し、3種類の色素の極性のために弱まり、単一の有機溶媒または異なる比率の混合溶媒を発泡剤および溶出剤として適切に選択することができる。 最適な分離条件を決定した。
